Rayの部屋で、仕事でわないよ
原文全英,作者Danieli.Arnon,1948年的論文(要死……我要最新的研究論文的阿orz)
翻譯是個人為便於理解而作的,僅供參考,謝絕轉載
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僅僅是部分原文翻譯……因爲看不明白……orz
估計問題挺多的orz
09-12-14
用于粉碎葉片的操作是劇烈的並且導致細胞質体包括葉綠體的破裂。然而,在本例中,酶繼續存在于上述操作所獲得的碎片中的細胞質懸浮液内,且其不存在于細胞質基質,是以這種酶最初定位于葉綠體中為其強有力的推定證據的。相反,這種酶能部分或全部在細胞質流体中被發現,不能輕易排除其随着葉綠體碎片經過的可能性。更進一步的實驗将通過修改在几个方面的實驗操作,并特別注意到可能引起不同實驗結果的不同操作技術的差异,驗證多酚氧化酶在葉綠體中定位的結論
a)如果多酚氧化酶在葉片内出現于細胞質流體,那麼前面用于分离葉綠體碎片的高速离心将也会沉淀這些酶。這一點可以通過向葉片勻漿中加入天然的馬鈴薯多酚氧化酶、並進行葉綠體碎片分离操作進行驗證。馬鈴薯多酚氧化酶使用類似于XXXXX所給出的方法製備。
把準備好的葉片勻漿分成两份。一份加入以15M磷酸緩衝液(pH6.5)溶解的馬鈴薯多酚氧化酶,另一份不加作爲對照。然後通過高速离心将两份勻漿中的葉綠體碎片除去。剩下的細胞質流體測量多酚氧化酶活性。加入的馬鈴薯多酚氧化酶被回收在細胞質流體中,結果如圖6所示。从加入馬鈴薯酶液的匀漿中分离出来的葉綠體懸浮液中,多酚氧化酶的活性并没有增強。因此可以下結論:葉綠體懸浮液中的多酚氧化酶活性与高速离心過程中引起的沉澱没有關係。
b)提取緩衝液pH的作用。
……尽管在這個研究中使用的準備方法的pH都是6.5,仍很有必要在更碱性(pH 7.3)的条件下提取葉綠體懸浮液,以檢驗H+离子濃度對多酚氧化酶活性的影响。使用pH 7.3的15M磷酸鉀緩衝液進行研磨叶片及復懸浮葉綠體碎片的操作,其他操作与前述相同。結果如圖7所示,与前面所提到的一致,在pH 7.3的條件下,葉片提取物中多酚氧化酶活性同樣定位在葉綠體中。
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